回答1、获取目的基因:目的基因可以从基因文库中得到,也可以用聚合酶链式反应扩增或者化学的方法去人工合成。2、构建基因表达载体:用限制酶切断细胞中的脱氧核糖核酸分子,将细菌中的质粒取出,用连接酶连接并重组脱氧核糖核酸分子和质粒。3、目的基因的导入:将目的基因导入到受体细胞中,包括植物细胞、动物细胞和微生物细胞。4、目的基因的检测和鉴定:检测目的基因是否翻译成蛋白质,鉴定要进行抗虫、抗病和活性鉴定。
一、转基因抗虫棉的培育过程
1、获取目的基因
目的基因可以从基因文库中得到,也可以用聚合酶链式反应扩增或者化学的方法去人工合成。基因文库就是把生物的不同基因的脱氧核糖核酸片段,并导入到受体菌中,使各个受体菌都含有该生物的不同基因。聚合酶链式反应扩增就是在生物体外部复制特定的脱氧核糖核酸片段,可以由此获得目的基因。
2、构建基因表达载体
用限制酶切断细胞中的脱氧核糖核酸分子,将细菌中的质粒取出,用连接酶连接并重组脱氧核糖核酸分子和质粒。
3、目的基因的导入
将目的基因导入到受体细胞中,常用的受体细胞中大肠杆菌、酵母菌和动植物细胞等,导入途径类似细菌和病毒。要将目的基因导入植物细胞、动物细胞和微生物细胞,导入到植物细胞使用的是农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法,导入到动物细胞要运用显微注射技术,导入到微生物细胞要进行钙离子处理。
4、目的基因的检测和鉴定
目的基因的检测要注意检测转基因生物染色体的脱氧核糖核酸上是否插入了目的基因,检测目的基因是否转录出了信使核糖核酸,检测目的基因是否翻译成蛋白质。目的基因的鉴定要进行抗虫鉴定、抗病鉴定和活性鉴定。
二、转基因抗虫棉的育种原理
转基因抗虫棉分为单价和双价,单价抗虫棉的育种原理是将细菌来源的、可以破坏棉铃虫消化道的基因改造转入到棉花中,让棉花细胞中可以存在这种杀虫的消化系统,起到抗虫的作用。双价抗虫棉的育种原理是将两种抗虫基因同时导入到棉花中,两种基因起到互补的作用,可以增强棉花的抗虫性。
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