毒蜘蛛的天敌是寄生蜂、寄生蝇、小头蚊虻、鸟类、蟾蜍。
1、寄生蜂：寄生于毒蜘蛛卵内，吃掉还未成型的毒蜘蛛。
2、寄生蝇：寄生蝇的幼虫在毒蜘蛛卵袋中发育，吸收掉本应属于毒蜘蛛幼体的营养。
3、小头蚊虻：小头蚊虻以幼虫的形式寄生到毒蜘蛛体内，从内部慢慢吃掉毒蜘蛛。
4、鸟类：大部分鸟类的食谱里都有蜘蛛。
5、蟾蜍：蟾蜍也叫蛤蟆，两栖动物，体表有许多疙瘩，内有毒腺，俗称癞蛤蟆、癞猴子、癞刺、癞疙宝。在我国分为中华大蟾蜍和黑眶蟾蜍两种。
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